文|渔事农谈

编辑|渔事农谈

1.介绍

在畜禽日粮中添加抗菌剂是为了预防疾病和减少生产环境中的发病率。研究表明，添加抗菌剂可以通过增加养分利用率来改善生长性能。

口服抗菌剂通过减少对营养物质和微生物的竞争，对宿主生长性能有负面影响的代谢物直接影响胃肠道内的微生物群。

在磷缺乏的玉米豆粕日粮中添加抗微生物菌素对猪对干物质(DM)、总能(GE)、氮(N)、钙(Ca)或磷(P)的表观消化率没有影响。

然而，在猪日粮中添加维吉尼霉素可以提高磷的利用率和氨基酸、DM和GE的表观回肠消化率(AID)。此外，cyadox还能提高猪的生长性能和磷的消化率。

由于内源性植酸酶产量低，猪和鸡不能有效地利用主要储存在谷物和油籽粕中的磷作为植酸，因此需要在饲粮中补充外源性植酸酶，这可以减少无机磷的补充，从而减少磷排泄到粪便和环境中。

饲粮中可同时添加植酸酶和抗菌剂。

由于已知在缺磷日粮中添加植酸酶可以提高磷的消化率，并且一些研究表明某些抗菌剂也可以提高磷的消化率，因此确定添加抗菌剂是否会影响磷对植酸酶的消化反应是很有意义的。

目前的实验评估了猪和鸡对饲粮中添加3种抗菌剂(泰洛菌素、维吉尼亚霉素或卡多克斯)单独或与植酸酶联合使用的反应。

2.材料与方法

2.1.实验一和实验二

杂交(约克郡长白杜洛克)犊牛(试验1中n=24，体重17.5±0.48 kg，试验2中的n=72，体重=19.1±0.23 kg)被单独饲养在不锈钢代谢箱(0.83 m×0.71 m)中，允许单独收集粪便和尿液。

称重后，按体重分为6(试验1)或8(试验2)个组，在组内随机分配饲粮。

试验1为20 ~ 30 kg猪配制了基础阴性对照(NC)玉米-豆粕型饲粮，该饲粮缺乏可消化磷，但满足或超过其他营养推荐值。

其他三个饮食包括抗菌预混料，准备用玉米作为载体和添加到数控饮食供应55公斤饮食,44 mg泰乐菌素每公斤饮食,或11毫克维及霉素(表1)。

饮食经验2包括一个基底，玉米餐数控类似于实验一。以玉米为载体制备植酸酶预混料，提供500或1500个植酸酶单位(FTU)/kg(表2)。

使用的植酸酶是在里氏木霉中表达的大肠杆菌6-植酸酶。制备抗微生物预混料，分别提供0,44 mg/kg泰洛菌素或28 mg/kg维吉尼霉素(表2)。

饲粮按植酸酶(0,500或1,500 FTU/kg)和抗菌剂(无泰洛菌素或维吉尼菌素)的3×3因子排列，试验1和试验2的饲粮均以糊状饲喂。

营养平衡方案遵循之前描述的程序。按体重的4%饲喂，分2个日饲料，分别于09:00和18:00饲喂。

收集期开始和结束的标志是在早餐中添加氧化铬，并观察其在粪便中的外观。

在收集期间，每天收集两次粪便总量，存放在20℃，直至收集期结束。每天测量并记录尿量，取30%的亚样本保存在20℃，待进一步处理。

每天在尿液收集桶中加入10毫升30%甲醛溶液，以减少氮的挥发和细菌的生长。尿液收集开始于喂食起始标记物，结束于喂食终止标记物。

每天收集剩余饲料和废物并干燥，以准确确定采食量。试验1为5天适应期后5天采集期，试验2为7天适应期后7天采集期。

2.2.实验三

雄性罗斯708日龄肉鸡在孵化后第1 ~ 5天饲喂标准肉鸡初级饲粮，所有肉鸡饲养在不锈钢电热笼中，并在孵化后第1至7天将温度降至35℃，第7至14天将温度降至32℃，第14至23天将温度降至27℃。

按初始体重(84.7±1.2 g)称重，分为10个组，在组内随机分配不同的饲粮处理。试验3的饲粮由缺乏可消化磷的基础玉米-豆粕组成，但满足或超过了NRC建议的所有其他营养素。

植酸酶预混料以玉米为载体制备，提供0,500或1,500 FTU/kg(表3)。使用的植酸酶是在T. reesei中表达的大肠杆菌6-植酸酶。

制备抗微生物预混料，分别提供0,44 mg/kg泰洛菌素或11 mg/kg维吉尼霉素(表3)。饲粮也按植酸酶(0,500或1,500 FTU/kg)和抗菌剂(无泰洛菌素或维吉尼菌素)的3×3因子排列。

饲粮以糊状饲喂，添加5g TiO2作为评价营养物质消化率的可消化指标。

孵化后第5天，对720只雄鸟进行称重、分类，按体重分为10个组，组内分别饲喂9种日粮。

采用随机完全区设计(RCBD)，每笼8只，每笼10个区。在试验开始和结束时分别称重，计算体重增重、采食量和G:F比。

监测鸟类死亡率，并对任何被移走的鸟类称重，根据估计个体采食量的模型调整采食量和G:F比。

在孵化后的第23天，用CO2使鸟类窒息，并从回肠远端三分之二处收集回肠食糜。禽鸟的回肠内容物用蒸馏水冲洗到塑料容器中，用笼子汇集，并储存在冷冻室(20℃)中，直到干燥和研磨。

每笼中4只最重的鸟取左胫骨进行骨灰测定。收集的排泄物在实验结束前放入笼中存放3天，存放在20℃，待干燥和研磨。

2.3.化学分析

在实验1和2结束时，用玻璃棉将尿液解冻并过滤，将粪便、粪便和尿液称重，并在55 ℃的强制通风烘箱中干燥。使用研磨机研磨饲料和干燥的粪便，并进行抽样分析。

在实验3中，回肠消化物和排泄物在55℃的强制通风烘箱中干燥。日粮、干回肠食糜和排泄物按上述方法研磨。在105℃下干燥24 h，测定日粮、粪便、回肠食糜和排泄物的干物质。

采用绝热弹量热法测定饲粮、粪便、尿液、回肠消化物和排泄物的总能。

磷的测定采用比色法，在湿灰样品中加入酸钼酸盐和菲斯克亚巴罗还原剂溶液。颜色强度与分光光度法估计的P浓度成正比。

采用火焰原子吸收光谱法测定了饲粮、粪便和排泄物中钙的浓度。采用燃烧法分析饲粮、粪便、尿液、回肠消化物和排泄物的氮含量，使用LECO型号fp - 2000型氮分析仪。

在实验3中收集的胫骨在索氏提取器中脱脂，干燥，称重，并在600 ℃的马弗炉中进行灰分测定。饲料和排泄物中钛的分析方法是用60%硫酸消化样品，然后在混合物中加入30% H2O2。

然后制备混合物，并使用410 nm光谱学读取。

2.4.计算及统计分析

在试验1和试验2中，营养物质的表观全消化道消化率和保留率由以下公式确定:消化率(%)=100 [(摄入量-粪便排出量)/摄入量]，滞留量(%)=100 [(摄入-粪便排出量-尿液排出量)/摄入]。

在实验3中，采用指数法测定AID和retention，公式为:

AID或retention(%)=[1-(Ti/To)×(No/Ni)]×100

其中Ti为日粮中钛的浓度，To为回肠食糜或排泄物中钛的浓度，No为回肠食糜或排泄物中营养物质或GE的浓度，Ni为日粮中营养物质或GE的浓度。

实验一的数据作为RCBD进行分析，块为5自由度(df)，日粮为3自由度(df)。使用单自由度对比来比较每种抗菌剂与不含抗菌剂的阴性对照饮食的效果。

实验二和实验三的数据被分析为3×3在RCBD中的阶乘，分别为实验二或三中的7或9 df用于抗菌，2 df用于植酸酶，4 df用于抑菌，通过植酸酶相互作用。

使用抗菌剂中植酸酶的对比以及每种抗菌剂与不含抗菌剂的阴性对照日粮的对比来分离手段。

由于植酸酶处理是不均匀间隔的(0,500或1,500 FTU/kg)，因此使用交互式矩阵语言程序来生成结构不均匀间隔水平的对比系数。采用0.05的水平来确定平均值之间的显著性，0.05到0.10之间被认为是趋势。

3.结果和讨论

卡巴多、泰络素和维吉尼霉素的分析夹杂水平分别为48.9 mg/kg、38.1 mg/kg和10.2 mg/kg(表1)。实验开始时，猪被认为是健康的，没有任何疾病的临床症状。

各处理猪的初始体重为17.5±0.48 kg，最终体重(分别为18.4、18.7、18.1和17.8±0.69 kg)不受饲粮影响(P>0.10)。

饲粮中添加抗菌剂不影响DM、N或GE消化率(P > 0.10)或DM保留率(P > 0.10，表4)。

与NC饲粮相比，添加卡多克斯可将GE保留率(P < 0.05)从83.4%提高至84.9%，n校正GE保留率(P < 0.01)从79.2%提高至81%。

在NC饲粮中添加泰络菌素显著降低(P < 0.05) 保留率，从63.3%降至56.3%。

与NC饲粮相比，添加卡瓦多提高了GE消化率和保留率(P < 0.05)，添加维吉尼霉素有提高GE消化率和保留率的趋势(P < 0.1)。

补充抗菌剂对磷和钙的消化率和保留率没有显著影响(表4)。

所分析的植酸酶浓度在NC饲粮中约为<50、610或1,660 FTU/kg，在含有泰菌素的饲粮中约为<50、527或1,370 FTU/kg，在含有维吉尼霉素的饲粮中约为<50、511或1,560 FTU/kg(表2)。

在含有0、500或1,500 FTU/kg植酸酶的饲粮中，泰菌素的分析浓度分别为40.2、34.1或38.7 mg/kg。

在饲粮中添加0、500或1500 FTU/kg植酸酶的维吉尼亚霉素浓度分别为24.9、14.88或15.32 mg/kg(表2)。

添加抗菌剂不影响磷、钙、氮或GE的消化率或保留率。添加抗菌药物对钙的消化率和保留率没有影响(表5)。

然而，添加植酸酶线性提高了磷、钙、氮、磷的消化率和保留率(P < 0.01)(表5)。

在不添加抗菌素的饲粮中，植酸酶对钙的利用呈线性影响(P < 0.01)，而在添加泰洛菌素或维吉尼霉素的饲粮中，植酸酶对钙的利用仅呈趋势(P < 0.10)，导致抗菌素和植酸酶对钙的利用存在相互作用。

在添加泰洛菌素或维吉尼霉素的饲粮中，植酸酶线性提高了氮利用率(P < 0.05)，而在不添加抗菌剂的饲粮中则没有，导致抗菌剂和植酸酶对氮利用率的相互作用(表5)。

对添加500或1500 FTU/kg植酸酶的饲粮进行分析，NC饲粮中植酸酶的含量为660或2060 FTU/kg，泰菌素饲粮中植酸酶的含量为827或2350 FTU/kg，维吉尼亚霉素饲粮中植酸酶的含量为846或2370 FTU/kg(表3)。

在0、500和1500 FTU/kg时，分析的酪氨酸活性分别为45.1、33.3和41.3 mg/kg。分析了500和1500 FTU/kg时维吉尼霉素的活性分别为7.8、8.2和17.9 mg/kg。

第5 ~ 23天饲喂抗菌剂对最终体重、体重增重和采食量均无影响。然而，抗菌素对G:F比和胫骨灰分有显著影响(P < 0.05)(表6)。

与NC饲粮相比，泰洛菌素和维吉尼霉素提高了G:F比(P < 0.05)，而只有泰洛菌素提高了胫骨灰分(P < 0.05)。

添加植酸酶可提高第5 ~ 23天的体重增重、采食量和G:F比(P < 0.01)(表6)。

无论是否添加抗菌药物，添加植酸酶均可线性提高体重增重、G:F比和胫骨灰分率(P < 0.05)(表6)。

饲粮中添加抗菌素对肉仔鸡的表观回肠消化率和磷、氮、GE的沉积没有影响(表7)。

饲粮中添加植酸酶无论添加何种抗菌素，均能线性提高肉仔鸡的AID和P的沉积(P < 0.01)，但对氮和GE的利用没有影响。

饲粮中添加植酸酶和抗菌素对N的AID有交互作用(P < 0.05)，且在添加tylosin的饲粮中添加植酸酶有降低N消化率的趋势。

在饲粮中添加植酸酶可线性提高饲粮中含有维吉尼霉素的肉鸡的GE AID (P < 0.05)，但在饲粮中不添加抗菌剂或饲粮中添加泰洛菌素时，植酸酶的相互作用对抗菌效果无影响(表7)。

4.结论

总的来说，无论是否添加抗菌剂，添加植酸酶都能提高生长性能、营养物质消化率和保留率。

由于抗菌剂和植酸酶之间缺乏相互作用，饲粮中添加抗菌剂并不影响磷的消化率或保留。没有证据表明磷消化率对植酸酶的反应受到添加抗菌剂的影响。

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